CUSTOMER
客户中心
助力生命健康领域从基础研究到产业化的加速转化
(一)实验动物诱发性肿瘤的概念
利用化学致癌物质来诱发实验性肿瘤的动物模型,也是进行肿瘤实验研究的常用方法。目前使用较多的化学致癌物有多环碳氢化合物、亚硝胺和偶氨染料等。强烈的致癌物诱发出来的肿瘤,恶性程度高,容易将其做成一个可移植的动物肿瘤。
(二)常用诱发肿瘤动物实验方法
1.经口给药法是将化学致癌物于饮水或用含致癌剂的溶液灌胃,或以某种方式混合于动物食物中喂养动物而使之发生肿瘤。食管癌、胃癌、大肠癌等肿瘤常用此方法。
2.涂抹法 将致癌物涂抹于动物背侧及耳部皮肤,主要用于诱发皮肤肿瘤(如乳头状瘤、鳞癌等)。常用于此法的致癌物有煤焦油、甲基胆蒽等。
3.注射法是将化学致癌物制成溶液或悬浮物,经皮下、肌内、静脉或体腔等途径注人而诱发肿瘤。其中皮下和静脉注射最常用。
4.气管灌注法 常用于诱发肺癌。将颗粒性致癌物制成悬浮液直接注人或用导液管注人动物气管内。
5.穿线法适用于将多环芳烃类致癌物直接置于某特定部位或器官,如宫颈、食管和胃等。方法是将一定量的致癌物放置于无菌试管内,加热使致癌物升华,吸附于预制的线结上;将含有致癌物的线结穿人靶器官或靶组织而诱发肿瘤。
6.埋藏法将致癌物包埋于皮下或其他组织内,或将致癌物作用的器官、组织移植于同种或同品系动物皮下进行肿瘤的诱发实验。
(三)诱发肿瘤的基本要求
1.诱发肿瘤的方法简单易行,可重复性强。
2.肿瘤的诱发率应较高。
3.所诱发的肿瘤与人类肿瘤具有相似性。
4.要注意选择对所用致癌剂较敏感的动物种系。
5.所用致癌物的剂量要适当。不能使动物中毒死亡。又要在较短期内诱发较高比率的肿瘤。
6.诱癌动物要辅以适当的饲养条件。例如,大鼠饲喂含维生素 B过高的饲料会抑制奶油黄诱发肿瘤的比率。
7.诱癌过程最好伴有明显的癌前病变,以便研究肿瘤发病学,
(四)诱发肿瘤的注意事项
1.应设置严格的阳性和阴性对照。
2.有些实验除应用致癌剂外,还需辅以促癌剂,方能诱癌成功。
3.动物实验的结果常常不能类推到人类,在解释实验的意义时应注意到种属的区别。
4.诱癌实验中应十分注意对实验人员和环境的保护。
5.诱癌实验要注意将肿瘤发生的内因与外因结合起来分析。
(五)诱发性肿瘤动物模型
1.诱发性肝癌动物模型(carcinoma of the liver)
(1)模型简述:利用外源性化学致癌因素引起细胞遗传特性异常,呈现出异常生长和高增殖活性,形成肿瘤,常用口服致肝癌的物质有乙基亚硝胺(DEN),4-2甲基氨基偶氨苯(DBA)和黄曲霉素等。
(2)造模方法
1)DEN 诱发大鼠肝癌:用0.25% DEN水溶液灌胃,灌胃量0.25~1ml,连续灌胃6个月左右。
2)DBA 诱发大鼠肝癌:用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠4~6个月。
3)黄曲霉素诱发大鼠肝癌:用含0.015ppm黄曲霉素的饲料喂6个月。
(3)模型特点及应用:DEN诱发大鼠致癌率为70%,DBA诱癌率为60%,黄曲霉素诱发大鼠肝癌发生率为80%。此种方法从病因学角度分析,与人体肿瘤较为近似,故此类模型常用于肿瘤特点的深人研究。
2.小鼠诱发性皮肤癌动物模型(animal model of dermtic carcinoma)
(1)模型简述:实验性皮肤癌的复制影响因素很多。例如,动物的种类、致癌物及溶媒、致癌物的浓度涂抹频率及时间长短、皮肤所暴露的范围、致癌物质施于皮肤的方法都会影响实验结果。常用诱发皮肤癌的方法是用甲基胆蒽等强烈致癌物,虽然实验间期较长,但成功率较高。
(2)造模方法:用0.5%甲基胆蔥蓖麻油溶液涂抹小鼠背部(被毛已脱),每周3次,每次2滴,滴后用小毛刷涂匀。每日观察小鼠一般状况及背部皮肤变化,如背部毛又长出,仍需脱毛或剪毛,以便涂抹甲基胆蒽。涂抹 150~200天可成瘤,适时取瘤组织做病理检查。死后取肿瘤及各脏器镜检。
(3)模型特点及应用:涂抹甲基胆蔥后150~200天(平均178天),皆出现鳞状上皮痛,单发或多发,有在乳头状瘤部位癌变,亦有在其他部位突然出现者。鳞癌出现后,即停止涂抹甲基胆蒽。