(一)人肝癌、胰腺癌的原位移植动物模型(animal model of orthotopic implantation of humanliver and pancreas carcinoma)

        1.模型简述 人肝癌、胰腺癌不仅在裸鼠肝内、胰腺内生长成瘤，而且侵袭和转移较皮下移植模型更客观地模拟了人肝癌和胰腺癌的临床规律。建立的人肝癌胰腺癌裸鼠原位移植瘤，呈圆形、椭圆形或呈分叶状，少数移植瘤有完整的包膜形成，大多数移植瘤浸润周围组织，无完整的包膜形成，瘤体周围血管丰富。

        2.造模方法 选取 18~20g的裸鼠，麻醉后，打开腹腔，暴露肝脏或胰腺，将准备好的人癌组织块(新鲜无坏死的癌组织切成 2~3mm'小块)植入，缝合止血。当原位移植瘤长到1~2cm'时(3~5周)无菌取出肿瘤，同样方法在裸鼠体内传代移植。

        3.模型特点及应用 移瘤保留了人体原发瘤的形态学特点和功能，人肝癌移植瘤具有典型的人肝癌细胞的形态学特征，其细胞形状、组织结构、细胞类型和分化程度均保持一致。功能上保持分泌人甲胎蛋白和CEA的功能长期不变，而胰腺移植瘤的形态学特点与人体原发癌完全一致。

(二)人肺癌裸鼠原位移植(nude mice orthotopic model of human lung carcinoma)

        1.模型简述 动物于接种后 2~4周开始出现消瘦，于第4~5周便有动物恶病质死亡，肺内肿瘤呈灰白色肿瘤结节数量不等，肿瘤较广泛地浸润胸部器官，部分伴纵隔淋巴结转移。

        2.造模方法 PG为肺巨细胞癌，体外生长采用RPMI-1640培养液加10%小牛血清和双抗，以0.02%EDTA 和 0.25%胰酶消化收集细胞。移植时，裸鼠麻醉，颈部正中切开，暴露气管，用注射器向右主支气管注入 4X10⁵ PG细胞(液体总体0.03ml)肿瘤细胞。合切口进行饲养观察。

        3.模型特点及应用人体肿瘤原位移植使移植瘤的生物学特性更接近于人类原发瘤，有利于恶性肿瘤浸润表型的表达，成为研究人类肿瘤生物学特性和肿瘤治疗更为适宜的实验模型。

(三)大鼠 Walker-256乳腺癌肿瘤模型

        1.造模方法

        (1)腹水传代Walker-256 乳腺癌细胞:取冻存的 Walker-256细胞解冻,离心5分钟,弃上清,加入生理盐水或 PBS配成细胞悬浮液,4~8周的SD大鼠腹腔注射1ml瘤细胞悬液,一般1个冻存管的肿瘤细胞可注射1~~2只大鼠,喂养1周后若腹部隆起明显,即可以抽取腹水。若为血性腹水,则说明肿瘤细胞毒性太大,不宜接种大鼠,接种后致死率高;若腹水为清亮的黄色,则比较合适。

        (2)细胞计数,调整浓度,皮下接种肿瘤细胞:将抽得腹水按常规用细胞计数板计数后,加PBS或生理盐水调整浓度至1X107个/ml。动物选用雌性4周龄的 SD大鼠(Wistar 大鼠亦可),剃毛后,后腿或乳腺部位皮下接种 1ml肿瘤细胞悬液。大概1周后开始长肿瘤。

        2.模型特点 成瘤率高,对大鼠饮食身体状况影响不大:这种造模方法相对简单、周期短、成本低、成瘤率高、生长速度较一致。Walker-256 肿瘤模型大鼠一般身体情况改变不明显,体重也无下降,饲料摄人量和活动量均无减少。成瘤率基本能达到100%,肿瘤呈球形或椭圆形,肉红色,质地硬,边界清楚。肿瘤后期可能会出现老鼠相互间或自行啃食肿瘤组织的现象。成瘤后第1~2周肿瘤渐渐长大,但至第3周起可能出现部分肿瘤缩小或自然消退。

(四)肿瘤移植部位

        肿瘤通常采用皮下移植方式,也可采用原位移植。少数移植在足垫、脑内、肾包膜下、乳房脂肪垫、腹腔、胸腔等部位。

        1.皮下接种 操作简单,肿瘤表浅,便于观察,潜伏期短,肿瘤生长较快,是初步移植瘤促成的较好途径。但这种移植部位肿瘤转移发生较少,与人体实际有一定差距。

        2.腹腔移植 位置深,不易观察和测定,但操作简单,可出现一定比例的转移浸润和腹水,对肿瘤形态学、超微结构及转移等肿瘤恶性表现的研究,较皮下移植要好。

        3.原位移植 将人类肿瘤移植于动物相应器官(如人的肝癌移植到裸鼠肝叶上),人癌转移模型的原位移植是普遍应用的方法。原位移植已成功的有人的前列腺癌、肾细胞癌、结肠癌、胃癌和膀胱癌等,并成功建立了相应的肿瘤转移模型(图17-1-1~图17-1-4)。