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技术服务
高质量的数据和快速的周转期以支持各项药物开发、临床前研究和临床研究
一、实验原理
普通PCR(聚合酶链式反应)是一种用于在体外扩增特定DNA片段的技术。PCR的原理是基于DNA复制的过程,主要利用DNA模板、引物、四种脱氧核糖核酸三磷酸(dNTPs)和DNA聚合酶来扩增特定的DNA片段。PCR反应包括三个基本步骤:变性、退火和延伸。
变性:将DNA模板加热至94-98°C,使双链DNA解旋为单链,以便后续的引物结合。
退火:将温度降低至50-65°C,使引物与各自的互补序列结合。 延伸:在72°C左右,DNA聚合酶开始从引物的3’端开始合成新的DNA链。
二、实验流程
1. 样本准备:
2. DNA纯化与定量:
3. PCR反应混合物的准备:
4. PCR扩增:
5. PCR产物的分析:
6. 数据记录与报告:
三、送样要求
1、样本类型:组织、细胞或血液。
2、样本保存:DNA样本通常需要在-20°C或-80°C下保存,并在运输过程中使用干冰或冰袋。
3、样本纯度:要求提取的DNA样本足够纯净,无蛋白质、脂质或其他杂质污染。
4、 样本浓度:DNA浓度应适合PCR反应,通常在10-100 ng/µL范围内。
5、避免降解:确保在样本处理和运输过程中避免DNA的降解。
6、标签和记录:每个样本应清晰标记,并记录相关信息,如样本来源、提取日期和纯度等。