从国内恶性肿瘤细胞系建立的报道中分析归纳，建系标准一般应包括以下内容。

 (1)肿瘤细胞系的共同特征：肿瘤细胞在体外培养半年以上，生长稳定，保持细胞特征，并能连续传代的，可称为连续性系或株，肿瘤细胞系的共同性鉴定，要注意以下事项。

        ①培养细胞的组织来源。

        A.在采取组织标本时，要记录患者的姓名、年龄、性别、病历号、临床诊断(分期)和病理诊断。

        B.记录培养日期和培养方法。

        C.在手术或活检标本的组织旁切下一小块组织，作病理切片和病理诊断，要按组织学类型诊断。

        ② 形态观察

        A.光学显微镜下观察活细胞与染色细胞的肿瘤特征，如细胞大小不等，细胞铺满瓶底后有重叠现象，胞质和核的比例与正常细胞不同，肿瘤细胞的核大、胞质少，核内不均匀性，染色质增加，核仁增大或增多等。如为上皮癌，在相差显微镜下可见到细胞间桥，如为腺癌，则可见到分泌颗粒。

        B.透射电镜观察肿瘤细胞的超微结构：如细胞外形不规则，有较多的胞质突或微绒毛，细胞核形状不规则，核膜凹陷明显，核内染色质分布不均，有的凝为团块，核仁大，胞质内核糖体聚为聚核糖体。如为腺癌，应注意胞质中电子密度高的分泌颗粒。如为上皮癌，要注意胞质中的张力原纤维和细胞间的连接(如桥粒和半桥粒)等。

        ③ 生长情况。

        A.分裂指数。

        B.生长曲线。

        C.细胞群体倍增时间。

        D.集落形成率或贴瓶率。

        E.半固体培养中的集落形成率。

        ④细胞表面改变：刀豆球蛋白或其他植物凝集素试验。

        ⑤染色体分析。

        A.染色体众数与主干系形成。

        B.染色体分组。

        C.染色体分带。

        D.特殊标记染色。

        在建系过程中(包括原代培养)和建系后，最好间隔一定时间检查染色体的稳定性。

        ⑥异种移植：接种于大鼠、小鼠、仓鼠等的皮下、脑、眼前房和颊囊等部位，为降低被接种动物的免疫力，新生动物经X线全身照射或给予可的松，或剔除胸腺，或给予抗淋巴细胞血清。尽量用裸小鼠移植。裸小鼠先天缺失胸腺，因而缺乏细胞免疫应答，对移植的异种组织无免疫排斥反应。肿瘤细胞在裸小鼠体内长成肉眼觉察到的肿瘤，潜伏期为10d至几个月不等。在裸小鼠体内移植肿瘤的组织图像可显示原肿瘤的特异细胞形态。

 (2)人癌细胞系的个别特性。

        ①一些内分泌腺的肿瘤能产生激素体外培养成系的细胞仍保留这种特性，如胎盘的绒毛性瘤产生胎盘性促性腺激素(hCG)，绒毛膜癌分泌人绒毛膜促性腺激素、黄体酮和雌激素，用特殊的放射免疫法测定，乳腺癌细胞有雌二醇及黄体酮受体，垂体瘤分泌生长激素，人卵巢颗粒层瘤细胞系(HTOG)产生雌酮E和17B-雌二醇 E2。

        ②有的非内分泌脏器的肿瘤，也产生激素，称为产生异位激素的肿瘤，经体外培养成系后仍保留异位产生激素的特征，如未分化肺癌燕麦细胞癌，有的能产生5-羟色胺和促肾上腺皮质激素(ACTH)，人肺巨细胞癌细胞系PLA-801产生促性腺激素，甲状腺癌产生ACTH肝癌产生绒毛膜促性腺激素如黄体生成素(LH)，这些都是功能性肿瘤的代表。

        ③癌胚共同抗原。

        A.癌胚性蛋白质，如甲胎蛋白(AFP)，用免疫荧光间接法或平板双向扩散法显示肝癌细胞的 AFP。

        B.癌胚抗原(CEA)，如结肠癌、胰腺癌、食管癌。

        C.癌胎儿同工酶，如绒毛膜癌细胞系T3M-3用酶抗体法和酶组织化学法显示早期胎盘型碱性磷酸酶。

        ④一般腺癌(胃癌、肺腺癌)细胞系的鉴定：用过碘酸希夫染色(PAS)和黏液卡红染色或PAS和阿新蓝染色，胞质中有细滴状颗粒。电镜下有电子密度高的分泌颗粒。

        ⑤一般鳞状上皮癌细胞系的鉴定：如舌癌、鼻咽癌和皮肤癌等，尚没有特异性标志物的报道，除了从超微结构中的细胞连接、桥粒和胞质内的张力原纤维来证明有上皮细胞特征外，还可用抗人α-Keratin来鉴定细胞系来自上皮而非来自基质。也有用组织化学反应和一些植物凝集素的结合来区分培养细胞来自上皮或来自基质。

        ⑥用中间纤维鉴定人肿瘤细胞系的细胞来源。中间纤维(interfilaments，IFs)为蛋白质的多基因系统群(multigene family)，可有6个类型，从IFs类型可区分以下几类主要肿瘤。

        A.癌(carcinoma)有角蛋白(cytok-eratin )

        B.交感神经瘤如神经节神经母细胞瘤(ganglioneuroblastoma 和 pheochromocytoma)有神经丝(neurofilament)。

        C.横纹肌肉瘤有结蛋白(desmin)。

        D.神经胶质瘤有酸性神经胶质纤维蛋自(glial fibrillary acid potein， CFAP)。E.非肌肉肉瘤有波形丝蛋白(vimen-tin )

        此外少数细胞类型无 IFs。

        还可用单克隆抗体区分不同的细胞角蛋白多肽。

        ⑦ 其他如下。

        A.特殊色素：如黑色素瘤，多巴反应阳性，细胞内保持有黑色素颗粒，在培养过程中有减少倾向。

        B.标志染色体：用G带等方法寻找恒定的特殊标志染色体。

        C.特殊蛋白质：如人脑恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中存在S-100蛋白，CFA蛋白的免疫酶标组织化学呈阳性。

        D.标志酶：如OUR-10人肾癌细胞系的谷氨酰转肽酶(7-glutamyl-transpeptidase )

        E.细胞表面特异性抗原或特异受体。

(3)细胞系污染的鉴定(见4.5节)。