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食管、胃、肠、肝解剖取材与固定
更新时间: 2024-12-27 15:33

一、大鼠、小鼠食管、胃、肠、肝的解剖取材方法

肝:用镊子夹住肝门部门静脉根部剪断血管和韧带。观察色泽有无脂肪肝,剖切面是否外翻,有无结节和肿瘤。

食管:是一条由咽发出,经胸腔穿过膈肌向下进入腹腔开口于胃的肌性管道,分为颈、胸和腹3部分取出方法是打开胸腔向上剪暴露出颈部,用解剖镊子夹将气管、食管、血管根部与心肺一块离断,轻轻从气管的背侧剥离出食管,立即放入固定溶液中进行固定。

胃:剖开腹腔见胃横卧于腹腔的前部,胃是消化管中最膨大的部位,呈囊状。胃取出方法是先用解剖镊子夹住动物的胃贲门处,用解剖剪剪下整个胃及十二指肠,用小解剖剪沿着胃大弯沿剖开,剖开胃后用生理盐水轻轻冲洗掉胃内的残存食物,观察胃黏膜层有无出血、糜烂、溃疡等详细记录。胃剖开后肌层平滑肌会收缩使胃黏膜层外翻,应先将其平展于滤纸片上并固定四周胃壁,连同滤纸一起直接再放入固定液中进行固定。

小肠:分为十二指肠、空肠和回肠。剖开动物腹腔后,用解剖镊子夹住肠系膜,选取所需要的小肠部位,如十二指肠取自幽门远端 5cm 处;空肠取自 Treitz 韧带远端5cm 处;回肠取自回盲瓣近端 5cm 处。轻轻地用生理盐水液冲洗干净,剪下适当长度的小肠段放入固定溶液中固定。

结肠:分为盲肠(最膨大)、结肠和直肠。结肠取回盲瓣远端5cm处。取材后尽快放入 Krebs 液内。

胆管:向上翻起肝见胆管呈浅色。胆总管起于肝胆管与胆囊管汇合处,止于十二指肠乳头。取材后放入固定液固定。

固定液用10%中性甲醛或 4%多聚甲醛,固定液是组织体积的 30~50倍,固定时间 24~48h,用振荡固定法更好(图 5-3-1~图 5-3-20)。

二、食管、胃、肠、肝固定后取材方法

食管:食管纵、横各切取一块 3mm 厚。

胃:胃底部、幽门、十二指肠各取一块 3mm 厚。

小肠:十二指肠、空肠和回肠各横切取一块或纵、横各切取一块 3mm 厚。

结肠:盲肠、结肠各横切取一块或纵、横各切取一块 3mm 厚。

以上部位固定后的取材方法见表5-3-1。

肝:取中间叶、左外叶各一块 3mm厚,或根据实验取病变部位 3mm 厚。

取材后放入包埋盒,流水冲洗,进入脱水包埋程序。

三、注意事项

(1)新鲜取材立即放入固定液中并摇动固定瓶,为避免组织与瓶壁粘连而影响固定液的渗透,采用振荡固定法。

(2)糖原极易溶于水,欲显示糖原的样品,固定前不可用水或生理盐水洗。

(3)肝较大应稍固定后,再切成片状更有利于固定液渗透,取材刀片一定要锋利,尽量不按压组织。

(4)胃肠组织先用生理盐水冲洗一下再放入固定液中固定。

(5)固定液体积需为所取组织体积的 30~50倍(图 5-3-21~图 5-3-24)。