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1.造模机制 胆结石形成主要是由于胆汁内胆固醇的含量超过了与胆汁酸和磷脂的正常比例,导致胆固醇结晶析出所致,与代谢关系较大。其复制机制主要为以下方面:
(1)感染:可使动物胆囊或胆管发生炎症,炎性渗出物中的脱落上皮、黏液、细菌集落等作为胆石形成的核心,有利于胆固醇、胆色素、胆盐等沉积并逐渐垒砌成胆石,炎性渗出物中的蛋白质产物还使胆固醇、胆红质的溶解度降低,并促使其形成结石。
(2)胆汁淤滞:奥迪括约肌痉挛、胆管受压时,胆汁在胆道中流通不畅,发生淤滞,可使胆汁中水分过多地被吸收而发生胆汁浓缩,胆汁成分自然析出,常常形成结石。
(3)胆固醇代谢障碍:高胆固醇血症时,由肝脏排入胆道的胆固醇也增加,胆汁中胆固醇浓度随之增高易于析出,沉淀形成结石。
(4)自主神经调节发生障碍:如切除动物迷走神经干,可使动物胆囊收缩无力、胆汁淤滞等动力学及胆汁中主要成分比例关系发生改变。胆汁中胆盐和磷脂含量降低使胆固醇不能完全形成微胶粒而呈过饱和状态,沉淀析出形成结石。
2.造模方法和特点
(1)感染法:选用家兔、大鼠或犬。无菌条件下剖腹术,显露十二指肠,从十二指肠乳头逆行插入一塑料管进入胆囊,从中注入蛔虫卵或大肠埃希菌悬液。
(2)狭窄成石法:①胆囊结扎法,选用健康成年家兔,无菌下剖腹手术,分清胆管与胆囊的关系,用银夹适当地夹住胆囊颈部,以产生部分梗阻;②胆总管结扎法,家兔剖腹后显露胆总管,在十二指肠上缘处用预先经双鲸蜡基-26烷磷酸钠浸渍外敷纤维素黏胶细带松松结扎一道。
(3)切除迷走神经法:选用成年健康家兔,性别不拘。无菌手术探明家兔胆道及胆囊正常,然后显露胃。贲门及食管,将食管悬吊,显露两侧迷走神经干,从食管下端切除两侧迷走神经干各1.5~2.0cm,均送病理检查证实。手术结束后,在腹腔内注入50%葡萄糖20ml,术后继续禁食16~20h。
(4)异物植入法:选用健康成年犬或兔,性别不拘。无菌下剖腹,显露胆囊,在胆囊底部切一小口,将已灭菌的蛔虫碎片(或人胆石、线结、橡皮等)植入胆囊内,然后荷包缝合胆囊。植入物应事先烤干至恒重,记其大小,以备实验前后称重及测量长度比较。可于2~3个月后剖腹检查。通常胆囊内植入异物后,早期发生炎症反应,胆囊内黏液增多,有时甚至形成黏液团块。
3.模型特点及应用
(1)感染模型:动物感染7个月后,胆囊呈慢性炎症,囊内结石形成。此模型除用于防治研究外,还可以进行有关胆系功能代谢变化的分析与观察研究。
(2)狭窄法模型:家兔胆囊结扎6个月后,胆囊中有明显结石形成。结扎家兔胆总管4个月后出现胆总管狭窄或完全梗阻,70%~80%出现胆囊结石,这种结石质软,色深,有的属于纯胆色素结石,但大多为含胆色素与胆固醇的混合结石,此实验模型可用于进行胆色素混合结石的发病学与防治研究。
(3)切除迷走神经模型:术后家兔胆汁成分明显改变,4~5周有胆固醇结石形成。
(4)异物植入模型:犬或兔异物植入2~3个月后,胆囊内可见到多数黑细砂,异物可被墨绿色的胆石成分所包裹。若植入数个异物,有时可以被结成一个大团块,此模型可用以进行中、西药物或其他治疗措施的防石,溶石研究等。