1.造模机制 肝小静脉闭塞病（hepatic veno-occlusive disease,HVOD）又称为肝窦状隙阻塞综合征（sinu-soidal obstruction syndrome,Os），是指发生于肝小叶中央静脉和小叶下静脉的非血栓性闭塞性疾病，其早期病理生理改变为肝窦内皮细胞损害致肝窦流出道阻塞。其常见病因有：①造血干细胞移植（hematopoietic stemcell transplantation,HSCT），化疗，放疗；②器官移植；③食用含吡咯烷生物碱（pyrrolizidine alkaloid,PA）的野生植物或草药。

2.造模方法

（1）肝小静脉闭塞病造模方法：用于建立该病模型的动物主要有大鼠（SD大鼠及 Wistar 大鼠）、小鼠、狗，文献报道目前有如下模型建立方法：

1）野百合碱（monocrotaline）－雄性 SD 大鼠模型：野百合碱 160mg/kg灌胃1次，分别于第 3~5 天及第6～7天表现出早期 HVOD及晚期 HVOD病理改变。

2L-NAME-小鼠模型：将 NG-硝基-左旋精氨酸甲酯（NG-nitro-L-arginine-methlester,L-NAME）加入小鼠食物中（浓度1mg/g），干预6周。

3）放线菌素D－雄性 Wistar模型：放线菌素D15μg/（kg·d）连续腹腔注射 3d。

4）野百合碱-狗模型：野百合碱125mg/kg，间断口服。

5）土三七总生物碱-雄性 SD大鼠模型：提取土三七总生物碱，600mg/（kg·d）灌胃3周。

6）土三七总生物碱-雄性小鼠模型：提取土三七总生物碱，50mg/（kg·d）灌胃4周。

（2）土三七水煎剂致大鼠肝小静脉闭塞病模型建立方法：

实验动物：6~7周龄SD大鼠（雌性/雄性）。

实验试剂：土三七[菊科菊三七属菊叶三七Gynura segetum(Lour.)Merr]块根。

1）土三七水煎剂制备：取土三七块根打碎，加水6倍，浸泡 2h，加热至沸腾后中火加热1.5h，滤出药液；再次加水4倍，同样方法煎煮1.5h，滤出药液；将以上药液合并后浓缩备用（雌性大鼠药液浓度：土三七1.5g/ml，雄性大鼠药液浓度：土三七0.75g/ml）。

2）动物处理：将 SD大鼠适应性喂养 3～5d后开始药物干预，根据不同性别采用不同浓度土三七水煎剂10mL/（kg·d）灌胃2周后处死大鼠，采集标本。

3.造模特点 以上各种肝小静脉闭塞病造模方法各具特点，其中野百合碱一次灌胃所致肝小静脉闭塞病模型较为稳定，可重复性强，病程各阶段特点较为明确。其发病为急性过程，与干细胞移植相关 HVOD发病特点相似，有利于其发病机制及治疗的探索，然而该造模方法与摄入含 PA生物碱植物所致 HVOD 慢性发病特点差异较大，不能代表PA所致 HVOD的特点。L-NAME所致 HVOD模型的建立基于已有的对HVOD发病机制的认识而设计，有利于HVOD发病机制及治疗方法的研究。放线菌素D所致 HVOD模型建立揭示了一种少见的 HVOD致病因素，有利于从另一个侧面研究 HVOD发病机制及探索治疗方法。以上各模型动物均为雄性，不能进一步说明HVOD发病的性别差异，土三七生物总碱所致HVOD动物模型较符合 PA所致 HVOD发病特点，但其给药情况较临床土三七摄入差异较大。土三七水煎剂所致HVOD动物模型建立中采用了雌雄个体，并发现雌雄个体对土三七水煎剂的耐受存在差异，其中雌性个体更容易发病，且病情较重。

4.肝小静脉闭塞病模型的表现及指标检测

（1）肝小静脉闭塞病模型的动物表现不特异，可以出现毛色污秽、目眦分泌物增多、精神萎靡、少动及尿色变黄等表现。

（2）病理表现：大体标本，肝脏质硬，无硬化结节，剖面可见淤血、出血，下腔静脉及肝静脉主干及肉眼可见的分支管腔内无阻塞；光镜可见不同程度的肝小叶中央静脉（centrilobular vein,CV）内皮损伤、内皮下出血，肝窦内出血、淤血扩张，肝细胞凝固性坏死，CV内皮下及外膜纤维化。该病早期病理改变主要集中在肝腺泡Ⅲ带，严重者可有汇管区受累，同时CV及肝小叶内可有不同程度的炎性细胞浸润。

5.肝小静脉闭塞病模型的评价

优点：①方法简单，试剂价格低廉；②造模周期短；③药物干预方法与临床病人服用土三七情况接近。

缺点：土三七水煎剂有效成分浓度影响因素较多，可能影响模型的稳定性。

展望：该模型建立过程中发现雌雄个体对土三七水煎剂的耐受性存在差异，提示性别因素在土三七致HVOD过程中有一定影响，其中雌激素在 HVOD发病中的作用有待进一步研究。