肿瘤细胞的培养方法很多，主要有组织块培养法、酶消化法、钽网法、改良器官培养法等。对实体瘤而言，目前最常用的方法是组织块培养法和酶消化法。具体培养方法参见有关章节。

        肿瘤细胞培养的操作提示如下。

        (1)培养期间必须竭力防止细菌和霉菌的污染。

        (2)在原代培养中，常见有正常成纤维细胞混杂生长。由于成纤维细胞增殖迅速，经常阻碍癌细胞生长，故应及时清除。

        (3)原发癌组织和转移淋巴结一样、有时发生淋巴母细胞样增殖。遇到这种情况应及时用等密度离心法清除这些细胞，否则癌细胞会被杀死。

        (4)如果实验室同时保存或使用多种其他细胞株，应避免细胞株之间的污染。

        (5)当癌细胞还没有生长到足以覆盖培养瓶底壁的大部分表面以前，应该耐心等待，不要急于传代。

        (6)从原代开始到第10代左右期间培养细胞的增殖不稳定。因此，在传代操作中必须很慎重，早期传代培养过程中应适当提高接种细胞密度，并且确定适合该细胞的培养方法。

        (7)癌细胞经常重叠生长，如果混有成纤维细胞，可用吸管吹打或低浓度胰蛋白酶消化，分离出癌细胞并传代培养。

        (8)对于增殖能力极低的细胞，可用经50Gy照射的成纤维细胞单层培养物作为饲养层，或者向培养液中加一种或几种促细胞生长因子，根据细胞种类不同选用不同的促生长物质，常用的有胰岛素、氢化可的松、雌激素以及表皮生长因子、转铁蛋白等生物活性因子。

        (9)在成纤维细胞同癌细胞长期共存情况下，一般都希望对癌细胞进行选择性传代培养。而成纤维细胞常常生长较快并超过癌细胞的生长，导致癌细胞生长受阻以至逐渐消失。因此，消除成纤维细胞成为癌细胞培养中的重要条件。具体方法见第4章。