在细胞培养中，结缔组织细胞最容易生长，不需要特殊条件，常规培养即可。这些细胞往往统称为成纤维细胞，目前尚无确切的分类。成纤维细胞系，例如鼠来源的3T3系，可分泌I和Ⅲ型胶原，大量分泌亚型胶原则是结缔组织细胞的特点。结缔组织细胞，特别是小鼠胚胎纤维细胞，可能向几个方向分化，3T3细胞还可被诱导分化为脂肪细胞。人、仓鼠和鸡的成纤维细胞在培养器皿中长满时呈梭形而小鼠成纤维细胞则可为铺路石状(pavement-like)。NIH3T3细胞在高密度生长情况下呈现为梭形。