一、肝脏移植术的目的及意义

从传统意义上来说，以往发生肝癌时只能采取保守的治疗手段如药物配合放、化疗;随着器官移植技术的不断发展，目前可以采用此项技术，提高了治愈率，改善了患者的生存质量。通过建立动物肝脏移植模型，为临床提供了可靠的依据。

二、大鼠肝脏移植术

（一）模型制备方法

1.异位辅助肝移植

(1)动物 健康大鼠(Wistar、SD、Lewis等)，雌雄不限，体重150~400g，受体体重等于或略重于供体，术前不禁食，清洁手术，借助额镜或手术显微镜进行操作。

(2)器械 显微外科手术镜一台，显微外科针持、组织剪各一把，眼科直弯手术镊各一把，哈巴犬钳两把。

(3)手术方法

1)供肝切取术 0.3%巴比妥钠(35mg/kg)腹腔注射麻醉或乙醚开放吸入麻醉正中切口进腹，分离门静脉、腹主动脉，经阴茎背动脉或腹壁静脉注入含肝素50U的生理盐水2ml使其全身肝素化。阻断左肾动脉以下的腹主动脉，插入一塑料管准备灌注，剪开膈肌，钳夹阻断胸主动脉，剪断肝上下腔静脉以及肝下下腔静脉(右肾静脉水平);通过导管低压注入4℃肝素平衡液(1:25U)至肝脏变白，完整切取肝脏，在冷冻平衡液中修剪，切除左、右肝叶，结扎肝总动脉、冠状静脉和肝下下腔静脉，保留肝尾叶和门静脉及胆总管，仔细修剪肝尾叶流出道，放入4℃冰箱中短期保存。

2)受体手术 同前述麻醉，手术前肌注阿托品0.03mg，腹正中切口，切除右肾轻轻分离门静脉和肝下下腔静脉，将供肝置于受肝肝下右肾窝内，放冰屑低温保护用无损伤自制沙氏钳不全阻断肝下下腔静脉，剪开一小孔，将肝尾叶流出道(供肝上下腔静脉)与受体下腔静脉行端侧吻合(8-0线)。用无损伤小弯血管钳不全阻断门静脉，剪开一相应小口，将供肝尾叶相连的门静脉与其行端侧吻合(9-0线)。Hess采用完全阻断受体肠系膜上动脉和门静脉情况下行供受体门静脉端吻合，同时开放门静脉和下腔静脉，然后在门静脉吻合上端冠状静脉下方结扎，以使受体脾静脉血和肠系膜上静脉血转入供肝，把供肝胆管插入受体十二指肠，用一针线固定于肠壁，检查无出血后关腹，术后肌注抗生素一次，注意保暖和观察呼吸情况，单笼喂养。

2.大鼠原位肝移植

(1)动物 健康大鼠(Wistar、SD、Lewis等)，体重250~400g，供体雌雄不限，受体雄性，供体略小于受体，术前12小时禁食，清洁手术，借助额镜和手术显微镜操作。

(2)器械 显微外科手术镜一台，常规显微外科手术器械，哈巴大钳，无损伤蚊式止血钳。

(3)手术方法(袖套法)

1)供体手术 供体大鼠行腹正中切口，游离肝，切断肝胃韧带，镰状韧带和左三角韧带，结扎切断左膈下静脉，游离肝尾叶及肝下下腔静脉，结扎切断右肾上腺静脉，经右膈肝间隙切断右三角韧带及肝后韧带，电灼肝后与食管间的血管交通支，游离门静脉，结扎并切断脾静脉和胃十二指肠静脉，距肝门1cm处游离胆总管，在其前壁做一横切口，插入外径0.8~1.2cm聚乙烯管，用5-0丝线环扎后，剪断远端胆管，肝游离完毕后，经腹主动脉抽血3~4ml(内加肝素)备输血，阻断门静脉远端血液，经肠系膜上静脉切开插入导管入门静脉，用含肝素25U/ml的平衡液6~8ml灌注肝，在右肾静脉水平切断肝下下腔静脉，让灌洗液流出，肝变白后切断肠系膜上静脉，向下轻轻牵拉肝，绕肝上下腔静脉环切膈和肝上下腔静脉，取出肝，置入0℃~4℃的冷平衡液中。修肝和准备血管袖套:修肝时用冰块维持水温在2℃~4℃，修剪去除门静脉(PV)，肝上下腔静脉(SVC)和肝下下腔静脉(IVC)上附着的软组织，然后将断口剪齐，依口径大小选择适当内径的聚乙烯管，将聚乙烯管制成血管套袖。SVC所用聚乙烯管外径2.42mm，内径1.67mm，IVC外径2.80mm，内径1.77mm，PV 外径1.90mm，内径1.40mm，各管体部刻上浅槽，将膈静脉各结扎线分别缝扎于SVC所用聚乙烯管端的四支脚上，较长-支脚应对前方以利夹持，把胸段下腔静脉尽量外翻套于聚乙烯管，以8-0丝线环扎固定于近肝浅槽(三细套法时用)将门静脉壁外翻套在外径1.9mm的聚乙烯管上，用5-0丝线结扎固定，同上法。用外径2.8mm的聚Z烯管处理肝下下腔静脉，将供肝放入4℃生理盐水中保存待用。

2)受体手术 麻醉后经腹正中长切口进入腹腔，游离肝方法与供体手术相同，在处理入肝血管前，向阴茎背静脉输入平衡液2ml，双重结扎切断肝固有动脉，游离近肝门处胆管，用5-0丝线结扎，近肝门剪断胆管，胆管备做stent支架吻合，在肾静脉水平阻断肝上下腔静脉，游离并结扎左右门静脉支，切断其肝侧，将肝向内下牵拉，用无损伤蚊式止血钳(其钳夹部用塑料管套保护)将肝上下腔静脉止血，切除受体肝，撤去麻醉口罩，原位置入肝，将供肝上、下腔静脉与受体下腔静脉端端缝合，采用7-0无损伤线后壁、前壁连续缝合，吻毕前用肝素盐水冲洗吻合口排尽残气。于门静脉干低位，即肠系膜上静脉汇入处阻断门静脉，在左右门静脉分叉处横行切开，用肝素盐水冲洗供受体门静脉腔。将受体门静脉左右支吊线牵向外上方，用一蚊式钳夹硅胶管袖套柄向下牵引，向远肝侧将袖套插入受体门静脉腔内。然后用5-0丝线环扎固定开放门静脉和肝上、下腔静脉，肝迅速恢复正常颜色，待供肝下腔静脉流血0.5~1ml后用小哈巴犬夹夹闭，与受体上下腔静脉两角吊7-0线，牵向外上方，同门静脉方法完成肝上下腔静脉袖套吻合，肝血流复通后经左或右腰静脉输入2ml糖盐水，最后将供体胆管插入受体胆管内，用5-0丝线环扎固定，在移植中应用4℃平衡液直接冲洗供肝以保持供肝低温，术后注意复温，两层缝合腹壁，术后3小时灯照保暖，3天内饮10%葡萄糖水，余饲正常。

(二)注意事项

1.一般肝移植手术成功率在99%以上，手术失败原因主要为出血、袖套扭转或脱落、吻合口不畅、胆道梗阻、门静脉栓塞、消化道出血和腹腔感染，需要实验用相应预防处理。

2.关于输液问题，一般主张在切受肝前和移植后补充平衡液或糖盐水2ml，必要时输血。输液有助于补充血容量，对回心血量骤减起到缓解作用，在门静脉、下腔静脉复通后，输入糖盐水，对血液的高钾和高凝状态起到稀释作用。

3.袖套口径应依大鼠体重和血管口径而异，不可过细和过粗，应用不当会发生回流不畅，袖套扭转、脱落以及门静脉腔张开不全，在多聚乙烯管体部加浅槽，可以结扎固定牢靠，不易脱落。

4.胆管吻合采用stent 支架套接或插管法，游离胆管时，注意保留其供血，不可过分剥离，以防胆道坏死及胆管瘘发生，亦可防止胆道梗阻，其原因可能为:①供体胆道插管较深，达左右肝管交叉处;②胆道插管较长，吻合后造成胆道扭曲:③胆道插管造成胆道黏膜损害和胆道的慢性感染，胆泥沉积于管壁:④胆道过细，插管后导致远端闭塞在这种情况下，可将供体胆道插管直接插入受体胆道内，甚至可进入十二指肠。