(一)大鼠腹腔异位脾移植

1.实验动物 供体大鼠为健康成年雄性远交系Wistar大鼠，体重180~240g。受体大鼠为健康成年雄性远交系SD大鼠，体重200~260g。

2.供体手术 大鼠称重，1%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉，仰卧固定腹部十字形切口，剑突悬吊，将肝轻轻翻向头侧，肠管及大网膜组织推向腹腔右侧提起胃体，充分显露脾并使脾胃韧带紧张，游离脾胃韧带至胃短血管，离断胃短动静脉，7-0线双重结扎切断胃左动静脉。切断脾结肠韧带，由下极向上沿脾蒂血管旁结扎并游离胰腺组织，游离、切断肝总动脉。在与脾静脉汇合处下方游离肠系膜上静脉，然后充分游离腹腔干及其下方的腹主动脉。自阴茎背静脉注入2ml肝素生理盐水(含肝素100U)使供体肝素化。结扎肠系膜上静脉，于腹腔干上方结扎腹主动脉。距牌静脉5mm处切断门静脉。18G套管针穿刺腹主动脉，5-0尼龙线环扎固定，向近心端腹腔干内缓慢、匀速、搏动性灌注4℃WMO-I液20ml至门静脉流出液清亮。结扎线下方切断肠系膜上静脉，于腹腔干上方4mm处离断腹主动脉，迅速取出脾。置入0℃~4℃的WMO-1号液中保存。冰盘上修剪移植物，4℃保存待移植用。

3.受体手术 沿腹白线正中切口，肠管用温盐水纱布包裹，推至腹腔左侧。游离左肾静脉以下腹主动脉和下腔静脉至髂血管分叉处，沿血管鞘将腹主动脉和下腔静脉完全分离。预阻断区内由腹主动脉发出和汇入下腔静脉的腰支及髂腰血管支，分别以7-0无创尼龙缝线打结阻断。将移植脾置于升结肠旁沟，摆好位置，表面覆以冰屑。阴茎背静脉静注2ml肝素生理盐水(含肝素100U)抗凝。血管夹依次阻断下腔静脉远心端和近心端，依移植物带门静脉段口径在下腔静脉表面剪椭圆形口，以9-0无创尼龙线自上而下行供受体门静脉-下腔静脉两定点双针端-侧连续缝合，吻合完毕后，血管夹夹闭供体门静脉段，解除下腔静脉阻断以恢复血液回流。血管夹依次阻断腹主动脉近心端和远心端，表面剪椭圆形口，9-0线行供受体腹主动脉-腹主动脉两定点双针端-侧连续缝合，动脉吻合口位于静脉吻合口以远(图15-1)。开放供体门静脉血管夹，按远心端、近心端顺序解除动脉阻断，此时可见腹腔干搏动有力，门静脉段充盈，移植脾由于一过性灌注而充血、肿胀，几分钟后逐渐恢复正常利用其表面残留的脾胃韧带与侧腹壁行三点固定。阴茎背静脉输注生理盐水2ml，关腹。手术在洁净条件下操作，术中及术后未用抗生素。术后动物应注意保温，8小时后喂水，16小时后喂食。术后第1天、3天、7天和14天行大体形态学及活检移植脾组织作组织学观察。

术后1天内动物死亡及移植物功能丧失被认为是操作失误。存活超过1天以上列为技术成功。手术失败的主要原因有吻合口出血、静脉血栓形成、门静脉扭曲等。术后大鼠逐渐苏醒，因创伤或疼痛刺激喜蜷曲体位，全身发抖，少动，以后逐渐恢复正常。体重1~2周时下降比例较大，之后逐渐恢复。术后死亡的主要原因为急性胰腺炎、腹腔感染和移植物抗宿主反应(GVHR)。

（二）大鼠颈部异位脾移植模型

1.动物 采用近交系雄性DA或Lewis大鼠作为供体或受体，体重220~360g。乙醚麻醉，术中不使用抗生素。

2.供体手术 肋缘下全长切口开腹后，静脉给予肝素300U，找到腹腔干发出的肝动脉和胃左动脉，分别结扎，并于切断胃脾韧带后切断之。将胰腺与紧邻的脾动脉分支小心游离开。于肠系膜上静脉和脾静脉汇合处以下切断肠系膜上静脉，然后结扎切断胃十二指肠静脉，于腹腔干发出点以远1cm结扎腹主动脉，并在其近端1cm处夹闭腹主动脉。最后分别于脾静脉和腹腔干头侧切断门静脉和腹主动脉，供脾保存于4℃生理盐水中。

3.受体手术 于右前外侧线垂直沿颈部走向，由颊底至锁骨切开皮肤，尽可能靠近端以血管夹夹闭颈外静脉和颈总动脉，并切断。袖套包括一个2.5mm长的本体和1.5mm长的延伸体。对于Lewis和DA大鼠的颈外静脉，选择内外径为1.20mm/1.70mm 的套管，Lewis 大鼠的颈总动脉采用内外径0.80mm/1.20mm的套管，DA 大鼠的颈总动脉适用内外径为0.58mm/0.96mm的套管。以7-0丝线分别环扎门静脉-外静脉袖套和主动脉-颈总动脉袖套。完毕后开放循环(图15-2)。