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帕金森病啮齿类动物模型的行为学评价方法

更新时间: 2025-01-24 14:56

自主活动计数

参照Kawai的测试方法，自制30 cm×30 cm×15 cm的有机玻璃盒，底部刻出6 cm×6 cm的格子，在安静、光线较暗的环境中检测。动物适应环境10 min后，计数5 min内动物移动的格子数和站立的次数，连续测5次，取平均值。

转棒实验

转棒实验需要动物在滚轴上保持平衡并连续运动，是广泛采用的检测运动协调性的实验。转棒直径6 cm，转速20 r/min，适应5次后，每次检测间隔1 min，连续测5次，取平均值。

爬杆实验

参照Ogawa的测试方法，自制直径18 cm，高60 cm的直木杆，杆顶部有一小木球，外面覆盖纱布以防止鼠打滑。鼠被头向上放于杆顶端，记录两个时间：动物从开始运动到完全转为头向下的时间和它们下到杆底的时间。每次检测间隔1 min，共检测5次，取平均值。

悬挂实验

参照Kuribara的测试方法，自制有机玻璃悬挂实验箱，水平放置的金属杆直径115 mm，距地面30 cm，金属杆上方1 cm加盖，以避免动物翻坐于金属杆上，实验中动物悬挂于金属杆上，记录落地前的时间，按下述标准评分：0~4 s评0分，5~9 s评1分，10~14 s评2分，15~19 s评3分，20~24 s评4分，25~29 s评5分，超过30 s评6分。每次检测间隔1 min，共检测5次，取平均值。

变异系数

几种行为学检测方法采用的单位不同，因此通过计算每只动物的5次检测结果的变异系数（coefficient of variation， CV），求出每种检测方法10只动物所得变异系数的x和s，进行行为学检测方法间的比较，对比不同方法测得结果的稳定性。在每种检测方法中按顺序计算10只动物第1~5次检测结果的平均值和标准误，求出每次结果的CV，反映第1~5次检测结果的变化趋势。

巴恩斯迷宫实验

啮齿类动物事先未进行过任何认知实验。实验前3 d，动物被允许探索在板子上留下的气味，每天共60 min，并适应它们饲养笼中的新“物体”。共进行10个实验期的检测：每天进行1期的实验，连续5 d，中途有2 d的时间间隔，然后接着另外5个连续实验期。每期的实验包括4个视觉空间和1个空间实验，在每个实验期后有10 min的间隔。在实验期间，动物被通过监测器进行观察，它们的行为被录像。在13：00和18：00点间对动物进行检测，最长检测时间90 min。进行视觉空间实验时，23个孔中的5个新的随机顺序的孔每天用胶带标记，并放置小片状的杏仁作为诱饵。将洞板放入笼子，直到动物访问完所有配备诱饵的洞。随后，洞板被从笼子中移走，并在此配备诱饵，再把板子放回笼子。进行空间实验时，孔盖上的标志被移走。在这4次视觉空间实验和一次空间实验中，所用的标记孔都是一样的。孔的顺序在下一次的实验中都会变换。计数孔的数量和记录动物访问孔的顺序，直到5个配有诱饵的孔都被找到。一个孔在被动物访问时，如果盖子被动物用前脚或鼻子活跃地移动，那么这个孔就被计数。对未配备诱饵孔的访问是一个错误的选择。对配备诱饵的孔的再次访问被定义为重复性选择。此外，测量每个动物花在访问这5个配备诱饵的洞的时间。以此实验检测判定3种PD模型制备后啮齿类动物空间认知能力的变化情况。

以上几种定量行为学观察法为帕金森病啮齿类动物模型提供了一些较为准确和客观的方法，同时也提高了整个实验的客观性。

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