一、概述

高尔基体是真核细胞中重要的细胞器，负责蛋白质的加工、分类和运输。为了研究高尔基体的功能以及与疾病的关系，科学家们开发了多种荧光探针。这些探针可以特异性地标记高尔基体，使得在活细胞中实时观察和研究成为可能。Golgi-Tracker 是一种常用的高尔基体荧光探针，可以携带不同荧光，它是一种神经鞘脂类荧光探针，可以用于活细胞高尔基体的特异性荧光染色。这种探针具有较高的摩尔吸光系数和光量子产量，光稳定性强，适合用于活细胞的脂类运输和代谢研究。

二、实验材料

PBS溶液、Golgi-Tracker Red、细胞核染料（Hochest等）、细胞培养相关耗材

三、实验方法

1、工作液的配制：首先，按照说明书浓度配置Golgi-Tracker Red工作液。工作液中Golgi-Tracker Red的浓度可以根据实际情况进行适当调整，推荐的稀释比例调整范围为1:50-1:200。

2、荧光标记：去除细胞培养液，清洗残留培养液，加入步骤1配制好的Golgi-Tracker Red染色工作液，与细胞4°C共孵育30min。

3、孵育：回收染色工作液，用冰浴预冷的细胞培养液洗涤细胞3次左右，换新鲜培养液37°C孵育30min。

4、染核：可以使用Hochest染核。

5、观察：用新鲜培养液再洗涤一次，随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到高尔基体呈明亮的强荧光染色，而细胞内的其他膜系统呈比较微弱的荧光染色。

注意事项：Golgi-Tracker Red可以用于活细胞的高尔基体荧光标记，但不适合用于固定细胞高尔基体的荧光标记。