一、概述

微管蛋白（Tubulin）是构成微管的蛋白质。微管蛋白染色是一种用于可视化细胞中微管结构的实验技术。微管是细胞骨架的主要成分之一，参与维持细胞形态、细胞分裂、物质运输等多种细胞活动。Tubulin-Tracker Green探针（也可以选择其他荧光标记）可以穿透活细胞的细胞膜，进入细胞以后会被催化为荧光形式，因其上带有紫杉醇，可以与微管蛋白结合，因而显示微管蛋白位置。此外，除了这种直接荧光结合的方式，还可以使用免疫荧光的方法检测微管蛋白。

二、实验材料

PBS溶液、Tubulin-Tracker Green探针、细胞核染料（Hochest等）、细胞培养相关耗材

三、实验方法

1、配制染液：根据说明书，配制Tubulin-Tracker Green染色工作液，使用前需37°C预温育。

2、洗涤：去除细胞培养液，用适量的溶液如HBSS或PBS洗涤生长在孔板、培养皿或爬片上的细胞。

3、染色：去除洗涤液，加入配制好的并37°C预温育的Tubulin-Tracker Green染色工作液，与细胞37°C共孵育30-120min，不同细胞最佳孵育时间可能有所不同，以30min作为初始孵育时间。

4、洗涤：去除Tubulin-Tracker Green染色工作液，用含染色增强剂(1X)的Tubulin-Tracker Green稀释液洗涤细胞2-3次。

5、染核：可以实验细胞核染料Hochest染细胞核。

6、观察：使用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察，Tubulin-Tracker Green为绿色荧光，Ex/Em = 496/526nm。观察时可看到微管呈清晰的绿色荧光染色。

注意事项：染色完毕后应立即观察，放置时间过长会导致荧光强度减弱。