实验方法

大鼠Von Frey纤维丝测痛实验

（1）取一系列 Von Frey纤维丝（1、1.4、2、4、6、8、10、15 g共8根），从4 g 开始对大鼠脚掌中部皮肤进行刺激，纤维丝弯曲至“C”或“S”型并维持约6 S，观察动物是否缩足并记录，每根纤维丝测试5次，每次间隔15 S，五次有三次缩足即可认为有反应。动物无反应记为“O”，有反应（缩足或舔足）记为“X”。无反应时，给予大一级力度的纤维丝刺激，有反应时则改用小一级的纤维丝刺激，反复类推。当动物出现“OX”（第一次没缩足反应，第二次有缩足反应）或“XO”（第一次有缩足反应，第二次没有缩足反应）的骑跨时，重复之前的操作步骤，再连续往后测量四次，得到一串以“O”或“X”组合的序列，将该序列与最后一根测试丝的编号输入动物50%缩足阈值公式，计算出动物的50%缩足阈值。

（2）50%PWT=（10^（Xf+kδ））/10000。Xf值：最后一根测试丝编号。δ值：（最大纤维丝编号-最小纤维丝编号）/（n-1），n为所选纤维丝的数量。k值：根据测量获得的“X”、“O”序列查表后获得的系数值。

数据处理及统计学方法

实验所得计量数据采用“平均数±标准误（Mean ± SEM）”表示。使用GraphPad Prism 8.0软件（USA，GraphPad Software）对所有数据进行统计分析、可视化作图。两组样本间的比较采用非配对t检验，多组样本间的比较采用单因素方差（One-Way ANOVA）检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。