一、实验方法

选取8周龄雄性SD大鼠，1%戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉动物，手术部位剃毛并常规消毒，于右侧膝关节内侧做长约2 cm纵行切口，钝性分离皮肤及皮下组织，从髌骨内侧缘进入，暴露出关节腔。将大鼠膝关节屈曲，暴露髁间窝，用显微剪横向剪断前十字交叉切带，同时切除内侧半月板前半部，生理盐水冲洗关节后缝合。

如图所示：对照组膝关节表面光滑，软骨颜色正常，模型组膝关节软骨表面粗糙，失去正常光泽，透明度下降，颜色略黄

如图所示：对照组膝关节表面光滑；模型组膝关节粗糙、骨赘增多

参考文献： IF 11.7   Zhu, J., et al., Stem cell-homing hydrogel-based miR-29b-5p delivery promotes cartilage regeneration by suppressing senescence in an osteoarthritis rat model. Sci Adv, 8, eabk0011 (2022), PMID 35353555

HE染色主要目的：观察骨组织形态结构及病变

如图所示：对照组膝关节软骨面光滑，无缺损，细胞排列规整；模型组膝关节软骨表面不平整，大范围骨侵蚀，软骨及软骨下骨被增生结缔组织取代，软骨细胞数量减少

参考文献： IF 11.7   Zhu, J., et al., Stem cell-homing hydrogel-based miR-29b-5p delivery promotes cartilage regeneration by suppressing senescence in an osteoarthritis rat model. Sci Adv, 8, eabk0011 (2022), PMID 35353555

番红固绿染色主要目的：观察软骨结构也可以看骨质

如图所示：对照组软骨细胞未见明显改变，结构正常，软骨呈红色；模型组软骨表面不平整，大范围骨侵蚀，软骨细胞数量减少，软骨基质着色变浅

参考文献： IF 10.7  Liu, L., et al., The physiological metabolite α-ketoglutarate ameliorates osteoarthritis by regulating mitophagy and oxidative stress. Redox Biol, 62, 102663 (2023), PMID 36924682

甲苯胺蓝染色主要目的：观察软骨结构

如图所示：对照组软骨细胞未见明显改变，结构正常，软骨呈蓝紫色；模型组软骨表面不平整，大范围骨侵蚀，软骨细胞数量减少，软骨基质着色变浅

参考文献： IF 26.8  Xie, R., et al., Biomimetic cartilage-lubricating polymers regenerate cartilage in rats with early osteoarthritis. Nat Biomed Eng, 5, 1189-1201 (2021), PMID 34608279

IHC

如图所示：模型组同对照组相比，软骨区域MMP13阳性信号增强。

参考文献： IF 10.7  Liu, L., et al., The physiological metabolite α-ketoglutarate ameliorates osteoarthritis by regulating mitophagy and oxidative stress. Redox Biol, 62, 102663 (2023), PMID 36924682