一、概述

细胞黏附实验是用来研究细胞与细胞外基质（ECM）之间相互作用的一种实验方法。细胞黏附是细胞生物学中的一个重要过程，它影响细胞的形态、迁移、增殖和分化。

二、 实验材料

PBS溶液、纤连蛋白、96孔板、胰蛋白酶、CCK8试剂盒、BSA、结晶紫、细胞培养相关耗材

三、实验方法

1、包被培养板：使用10μg/ml的纤连蛋白（或胶原）室温包被96孔板1h。

2、封闭未结合位点：用热变性的1%BSA在37℃下孵育孔板1h。

3、洗涤：使用无血清培养基洗涤孔板2次，去除未结合的BSA。

4、制备细胞悬液：用含EDTA的胰酶消化细胞，用含血清的培养基终止消化，再用无血清培养基洗涤细胞并重悬。

5、接种细胞：将细胞悬液（通常3-5×10^4个细胞/孔）铺在预处理好的96孔板中。

6、培养：将细胞培养箱中培养，时间视不同细胞而定，可能是1h到过夜。

7、洗去未粘附细胞：用PBS洗3次，去除未粘附的细胞。

8、细胞粘附检测：使用CCK-8检测试剂盒进行显色，然后用酶标仪在450nm处检测吸光度，从而反应粘附的细胞数。

9、数据分析：计算细胞粘附率，公式为（粘附细胞OD值/总细胞OD值）×100%。

注意事项：细胞接种密度不应过大，以避免在检测前细胞长满导致接触抑制。