1、细胞贴壁率

概述

细胞贴壁率适用于观察贴壁附着生长细胞，主要反映细胞的生存能力（因为只有活细胞才贴壁）和部分底物材料的生物相容性。

用品

与细胞传代和细胞计数法相同

步骤

（1）取对数生长期细胞，用消化法制成细胞悬液，计数后按检测细胞生长曲线的细胞接种原则接种培养瓶（浓度要相对较高）。一般接种12~15 瓶。

（2）每2h取出1瓶细胞，倒掉培养液（其中含有未贴附细胞），然后加入胰酶消化已贴壁细胞，计数已贴壁细胞，用下面的公式逐个计算每个时间组的贴壁率。一般观察 24 h，分12次进行。

结果

贴壁率=(贴壁存活细胞数/接种细胞数)x100%。

2、细胞周期

可利用培养细胞来研究细胞动力学、细胞的DNA合成代谢和有丝分裂。每一细胞增殖过程都要经过一个周期来进行，包括一个分裂间期也叫生长期和一个有丝分裂期（M期），生长期又可分为：A.生长前期（G₁），B.DNA合成期（S），C生长后期（G₂）。这3期的生长过程既有阶段性，又相互依存。因此一个细胞周期包括G₁、S、G₂和M4个时期。细胞周期与细胞群体倍增时间是不同的两个概念群体倍增时间是指在对数生长期细胞数量增加1倍所用的时间。这一时间内一般有些细胞参与分裂，有些细胞可能不分裂有些可能分裂两次或数次，但细胞总数量增加1倍。细胞周期仅指一个细胞的分裂生长周期，一般细胞周期都短于细胞群体倍增时间。细胞周期的时间测定有两种方法：

（1）同位素标记测定法：在细胞进入增殖期时用 ᶟH-胸腺嘧啶核苷标记细胞30min后，每隔30min取材1次，直到48h为止。然后应用放射自显影或液闪计数法来观察和计算细胞分裂相出现时间高峰和分裂相数，绘制成图进行计算。

（2）活细胞工作站测定法；应用活细胞工作站，连续动态观察记录标记的细胞分裂过程，精确计算细胞周期各个时期。