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细胞生长状况的观察——细胞分裂指数
更新时间: 2024-12-27 13:16

概述

细胞分裂指数是计算分裂细胞占全部细胞中比例的方法,用以表示细胞的增殖旺盛程度。一般要计算和观察1000个细胞中的分裂细胞数。

用品

(1)细胞传代的用品。

(2)培养细胞 HE染色用品(参阅后面相关章节)。

步骤

(1)用一般传代方法,按检测细胞生长曲线的细胞接种原则将细胞悬液接种于事先放置有小盖玻片的培养瓶内。

(2)每24h取出1个小玻片,按常规方法用95%乙醇固定,吉姆萨或HE染色、封片。

(3)选择细胞密度适中的区域观察分裂细胞,进行细胞计数。最好一个视野一个视野地进行。对每一时间组的玻片各取细胞数多、中、少3个区域各一区,共计数1000个细胞,计算出每1000个细胞中的分裂细胞均数值和所占比例。

(4)将所测得的百分数逐日按顺序绘制成图即为细胞分裂指数曲线图(图4-5)

操作提示

细胞分裂指数的观测要掌握好标准,对接近和将完成的分裂相要统一标准加以划分,减少误差;也可对同一组标本两人分别计数最后取平均值。细胞分裂指数曲线与生长曲线的趋势类似,只是在细胞总数达到平台时细胞数量很大,但细胞的分裂增值接近停止,分裂指数曲线值最低。