概述

        牙髓是一种疏松结缔组织，有多种细胞成分，体外培养时能够生长并传代的细胞形态类似成纤维细胞，但生物学特性与成纤维细胞不同，其中可能包括牙髓中的成纤维细胞和未分化的间充质细胞，被称为“牙髓成纤维细胞”“牙髓成纤维样细胞”，近年来多被称为“牙髓细胞”。

用品

        (1)同5.4.9节所需器械、器皿、培养液及牙齿标本。

        (2)牙科用裂钻、大号钢丝剪。

步骤

        (1)用裂钻沿牙齿长轴在对称的两面钻出深约1mm左右的沟，用大号钢丝剪将牙齿剪成两半。

        (2)用眼科镊取出牙髓，剪成小于1mm³的碎块，按组织块原代培养法常规培养。

        (3) 细胞长满瓶(皿)底80%左右时用胰蛋白酶消化法传代培养

操作提示

        (1)组织块酶消化法可获得的细胞游出率和存活率较高。

        (2)因标本的获取来自口腔，因此需要预防细菌污染。

结果及鉴定

        体外培养的牙髓细胞为成纤维样细胞，可传代培养，但传代次数少于牙周膜细胞。阳性表达的蛋白有波行丝蛋白、I型胶原、Ⅲ型胶原、碱性磷酸酶、BMP骨桥蛋白、骨涎蛋白、牙本质特异性非胶原磷蛋白等。在体外培养中可形成矿化的细胞外基质。