概述

        牙周膜细胞中有多种细胞成分，体外培养时能够生长并传代的细胞形态类似成纤维细胞，但具有成骨细胞的某些功能，其中可能包括牙周膜细胞中的成纤维细胞和未分化的间充质细胞，被称为“牙周膜成纤维细胞”“牙周膜成纤维样细胞”，近年来多被称为“牙周膜细胞”。

用品

        (1)组织块原代培养法常规器械、培养瓶或培养皿、培养液。

        (2)无菌条件下新鲜拔除的人或动物无疾病牙齿。

步骤

        (1)用锐利的刀片或剪刀在牙根中部1/3 处轻轻刮取牙周膜组织，如果超出此范围有可能混杂牙龈或根尖周组织。

        (2)将刮取的组织直接移入培养瓶或培养皿，按组织块原代培养法常规培养。

        (3)细胞长满瓶(皿)底80%左右3)时用胰蛋白酶消化法传代培养。

操作提示

        (1)组织块酶消化法可获得的细胞游出率和存活率较高。

        (2)因标本的获取来自口腔，因此需要预防细菌污染。

结果及鉴定

        体外培养的牙周膜细胞为成纤维样细胞，一般可传代培养20代左右。形态特点是细胞中含有丰富的糖原颗粒和发达的、具有半圆致密结节的微丝。阳性表达的蛋白有波形丝蛋白、I型胶原、Ⅲ型胶原、碱性磷酸酶、BMP、骨桥蛋白、骨涎蛋白、金属蛋白酶、金属蛋白酶抑制剂等。在体外培养中可形成矿化的细胞外基质。