人癌细胞培养所用的材料一般取自患者。对于实体瘤患者，通常取原发癌组织或转移灶。有癌性胸、腹腔炎的患者可取胸水或腹水。白血病患者可取血液或骨髓液进行培养。

        (1)实体瘤手术标本的取材方法：手术或活检切取的标本应立即浸入无血清培养液中并及时进行培养。一般认为活组织样本越新鲜，培养成功的机会越多。此外，应注意取未经任何治疗和没有坏死的样本进行培养为宜。如有溃疡或坏死则应尽可能避开，从癌组织深部取材。对有可能被霉菌或细菌污染的癌组织，如口腔消化道、呼吸道及生殖道等与外界交通的部位，则应在培养前将样本放人含二性霉素B2μg/mL、青霉素200~1000U/mL、链霉素500μg/mL的培养液中浸泡10~20min。然后，再用无血清培养液反复冲洗干净后，再进行培养。

        (2)体腔液的取材方法：当胸水、腹水中存在较多癌细胞时，可通过离心收集癌细胞进行培养。在无菌条件下抽取体腔液，不需要加抗凝剂，可直接以1200//min离心5min 收集细胞。不要久置，也不要在冰中冷却，而应及早接种和培养。

        (3)血液的取材方法：在急性白血病及恶性淋巴瘤病例中，主要以外周血中的肿瘤细胞为培养对象。用加肝素的注射器抽取5~10mL外周血，置于灭菌的塑料尖底离心管中。立即将离心管以50°~60°静置于37℃孵箱，放置10~30min后,将不含红细胞的血浆部分移入另一支管中，以1200r/min离心5min，弃上清液，将细胞重新悬浮于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中，以1x10⁶/mL细胞密度接种培养瓶中，进行悬浮培养。

操作提示

        (1)严格注意无菌操作，尤其是从手术台上收集标本，标本的切取、收集、转运等过程都需要严格无菌，否则很容易被细菌或霉菌污染。

        (2)获取的标本应该尽快进行培养，一般不超过2 h。

        (3)一般取材选择未经过任何治疗或坏死的样本。

        (4)取材时应选择癌细胞集中、细胞活力较好的部分，避开溃疡或者坏死区域。

        (5)血液取材需要加肝素，体腔液取材则不需要加抗凝剂。