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骨、软骨、关节、滑膜解剖取材与固定
更新时间: 2025-09-18 09:22

        1.成年动物骨、软骨、滑膜取材 新鲜取出犬、山羊、兔、大鼠、小鼠股骨头、长骨、扁骨组织,10%中性甲醛液固定 48~72 小时,将股骨头锯成 2~3mm 厚的片状,大鼠长骨锯成 5~10mm截面,更换新固定液继续固定48~72小时后人脱钙液中脱钙。家兔大鼠软骨取材方法:膝关节腔剖开后紧贴骨关节剖开后紧贴骨关节表面切取软骨;兔、大鼠滑膜取材方法:膝关节腔剖开后,紧贴骨关节表面带着软骨切取滑膜并用一次性帽子纸包好固定(图12-3-1~图12-3-12)。

     

 

        2.新生及胚胎小鼠骨骼取材 小鼠在胚胎期14天长骨开始发生钙化,所以主要介绍妊娠14.5天后的小鼠胚胎以及出生后小鼠骨骼取材(图12-3-13,图12-3-14)。

        (1)新生小鼠整体骨骼取材:乙醚麻醉或二氧化碳处死新生小鼠,放入60~70℃水中 30s。镊子小心剥离皮肤,去除眼球和内脏,进行全骨染色。

        (2)新生小鼠肢体长骨取材:新生小鼠,从背部沿肩胛骨和骶髂关节分离出前后肢。小心去除皮肤和肌肉,不要损伤骨膜。取出肢体立即放于10%中性甲醛液室温固定24~48小时,石蜡包埋制。

        (3)胚胎小鼠骨骼取材(14.5~18.5天胚胎):小鼠在胚胎期14天长骨开始发生钙化,主要介绍妊娠14.5天后的小鼠胚胎骨骼取材方法。人道处死孕鼠,剖腹取出子宫,生理盐水中洗一遍,剪开子宫壁,用镊子剖开胎膜,取出胚胎,生理盐水洗净胚胎表面黏液和血。

        (4)胚胎小鼠整体骨骼取材:整个胚胎可直接取材用于全骨染色(见全骨染色方法)。

        (5)胚胎小鼠肢体长骨取材:上肢取材从肩胛骨处分离上肢与胸廓的软组织,下肢取材贴近腰骶部,小心分离脊椎与下肢间的肌肉和软组织,从骶髂关节处分离出下肢。小心去除长骨表面的肌肉,不要损伤骨膜。将肢体放于10%中性甲醛液室温固定24~48小时。

        由于小鼠出生后四肢长骨已发生骨化,需脱钙处理才利于切片,因此不适合冰冻切片研究。

        骨、软骨、关节及滑膜固定后取材示意见表12-3-1。