一、概述

脂肪细胞原代培养是一种实验室技术，用于从动物或人类的脂肪组织中分离出活的脂肪细胞，并在体外条件下进行培养。这项技术对于研究脂肪细胞的生物学特性、分化过程以及与肥胖和糖尿病等相关疾病的机制非常重要。脂肪细胞为终末分化细胞，一般从脂肪组织分离出来的细胞为“前脂肪细胞”，可以分裂增殖，诱导分化为脂肪细胞。原代培养的脂肪细胞可用于研究脂肪细胞的分化、脂质代谢、胰岛素抵抗等生物学特性。

二、实验材料

PBS溶液、胰蛋白酶、DMEM/F12培养基、细胞培养相关耗材

三、实验方法

1、取材：通常使用4周龄的雄性Wistar大鼠或其他品系的动物。从附睾周围或腹股沟部皮下取材，清除血管和结缔组织。

2、消化：使用I胶原酶在37°C下消化脂肪组织，直到细胞混合物形成乳脂样浓稠液体 。

3、分离：通过离心和过滤来分离脂肪细胞和基质血管(stromal-vascular, SV)细胞。

4、培养：将分离出的细胞在含有适当血清和抗生素的培养基中培养。培养基的选择取决于细胞类型和研究目的，可能包括DMEM/F12、Ham F12等。

5、分化：通过添加诱导因子如胰岛素（10ug/mL）、地塞米松（1umol/L）等，促进前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化。

注意事项：不同来源的间充质干细胞基本上都可以诱导成脂分化，但是相对来说，脂肪组织来源的干细胞更容易分化为脂肪细胞。