一、概述

肌腱干细胞（Tendon Stem/Progenitor Cells，TSCs）是一类存在于肌腱组织中的多功能干细胞，具有自我更新和多向分化潜能。它们在肌腱的生长、发育、修复和再生过程中发挥着重要作用。肌腱干细胞的异常分化可能与肌腱病的发病机制有关，如钙化性肌腱病。在肌腱损伤后，肌腱干细胞可能参与肌腱的自然修复过程。

二、实验材料

PBS溶液、Ⅰ型胶原酶、中性蛋白酶、DMEM培养基、细胞培养相关耗材

三、实验方法

1、动物准备：使用8周龄的SD大鼠，取出双侧跟腱。

2、组织处理：剔除腱鞘及腱周部分，将肌腱剪碎成1mm x 1mm大小。

3、消化：每100mg组织使用3mg/mL的Ⅰ型胶原酶，和4mg/mL的中性蛋白酶，在37℃下消化1h。

4、终止消化：消化后，将组织直接种于细胞培养瓶中，并加入含抗生素和胎牛血清的DMEM培养基。

5、细胞培养：培养24h后，将残留的肌腱组织转移到新的培养瓶中，继续培养8至10天。

注意事项：原代细胞为P0代，一般可选P2-P3代细胞做实验。