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技术服务
高质量的数据和快速的周转期以支持各项药物开发、临床前研究和临床研究
一、概述
碘化丙啶(propidium iodide,PI)不能穿人完整的活细胞膜中,即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染,而坏死细胞由于失去膜的完整性,PI可进入细胞内与DNA结合,根据此特点,使用PI染色可鉴别死细胞。PI最大激发波长和最大发射波长分别为488nm和630nm,荧光显微镜观察,DNA呈红色荧光。
二、实验材料
PBS溶液、PI染液、4%多聚甲醛、细胞培养相关耗材
三、实验方法
1、细胞准备:单层细胞培养标本经预冷70%乙醇固定1h,4℃。
2、染色:PBS清洗,沥干后加入PI工作液,室温孵育15min。
注意事项:如果对活细胞染色必须在染色前进行固定,以增加细胞膜对染料的通透性。