细胞系的维持是培养工作重要内容。概括起来说细胞系的维持是通过换液、传代、再换液、再传代和细胞冻存与复苏实现的。每一个细胞系都有其自身特点，要做好细胞系的维持，必须注意以下几点。

（1）细胞系档案要记录好，如组织来源、生物学特性、培养液要求、传代、换液时间和规律、细胞的遗传学标志、生长形态、常规病理染色的标本等。这些记录对于保证细胞正常生长、保持细胞的一致、观察长期体外培养后细胞特性的改变都有十分重要的意义。因而无论在索取新细胞系或自己建立新细胞系时都要尽可能把上述资料收集齐全。

（2）细胞系的传代、换液一般都有自身的规律性，因而在维持传代时要注意保持其稳定的规律性，这样可以减少由于传代时细胞密度的频繁增减或换液时间的不规律，而导致细胞生长特性的改变，给以后细胞实验带来影响。

（3）多种细胞系维持传代，要严格操作程序，以防细胞之间的交叉污染或造成培养细胞的不纯。传代时所用器械要编号或做好标记，严禁交叉使用。

（4）每一种细胞系都应有充足的冻存储备，防止由于培养细胞污染等因素造成细胞系的绝种；另外二倍体细胞等有限细胞系如果暂时不用最好冻存以免传代太多，造成细胞衰老或生物学特性发生改变。