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实验动物解剖与取材

[ 时间:2024-06-12 阅读:61次 ]

一、实验前准备

(一)取材用具准备

取材用具包括动物固定板,刀片,大、小解剖镊子(含无齿镊),大、小解剖剪,止血钳,滤纸,纱布,棉签注射器,切取组织用的小蜡板,称量脏器组织的天平,尺子,铅笔,标签,固定容器,实验记录本等(图 2-2-1)。

图2-2-1.jpg

(二)取材试剂准备

麻醉药:吸入麻醉药(如三氯甲烷或乙醚)、注射用麻醉药等。

生理盐水:洗组织标本用。

固定溶液:10%中性甲醛溶液、4%多聚甲醛或 Bouin、Carnoy等特殊固定液。

(三)废弃物存放准备

用有明显标志的黄色垃圾袋,存放动物废弃脏器及尸体。用锐器盒存放取材废弃针头、刀片、注射器等。

二、实验动物解剖取材及注意事项

(一)解剖取材方法

动物处死或麻醉过程要迅速,避免动物较长时间处于应激或濒于死亡的状态,使机体内组织细胞结构发生改变而引起人为假象或病理假象,影响对实验结果正确分析。

以大鼠、小鼠为例:动物麻醉后固定四肢,将动物仰卧于解剖板上并用酒精或水湿纱布浸湿大鼠胸腹部皮毛,用大解剖剪将大鼠胸腹部依次打开,根据实验目的取出目标脏器(图 2-2-2~图 2-2-4)。

(二)肉眼观察并描述体表及脏器变化

在动物模型饲养期间,动态观察并记录其生活状态、生理指标。例如,高血压动物模型除定期检测血压,体重、尿量等之外,取材时还要对动物模型的体表外观及脏器进行肉眼观察,并做描述性记录。又如,大鼠急性肝坏死模型要对肝的大小、色泽、质地及剖切面进行描述记录;1型糖尿病大鼠模型,对外观,体重,被毛,色泽,眼白内障形成的时间及发展过程,肝、胰腺的大小、色泽、质地,胃肠有无胀气、睾丸大小等的大体形态描述记录;2型糖尿病大鼠模型,开腹后测量腹壁脂肪厚度、腹内脂肪分布情况等的描述记录;肿瘤模型,描述记录肿瘤大小、形状数目有无粘连、包膜是否完整、表面有无破溃、剖切面的色泽质地;类风湿关节炎模型,局部注射后何时出现足趾关节红肿变形、达到高峰的时间等进行描述记录(图 2-2-5~图 2-2-13)。

图2-2-2~6.jpg

图2-2-7~11.jpg

图2-2-12~13.jpg

(三)脏器取出方法

脏器取出方法见图2-2-14,图2-2-15。

图2-2-14.jpg

图2-2-15.jpg

(四)解剖取材注意事项

1.取脏器组织要快速,取好后立即放入固定液中。

2.取材尽可能不用有齿镊夹取,镊子不能直接夹住脏器组织,尽量用无齿镊夹住脏器周围结缔组织夹取,避免夹伤组织造成人为损伤(图2-2-16~图2-2-18)。

图2-2-16~17.jpg

3.肝、肾等较大的脏器可先将其切成较薄的块状组织,固定或稍固定后再切成片状继续固定。

4.垂体、肾上腺、甲状腺等小组织,应平贴于滤纸上再固定。

5.脏器上附有血液、黏液等污物时,用生理盐水冲洗后再固定。

6.取材时,切取的部位、位置、组织块的排列要规范统一。

7.消化系统空腔脏器,按胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠的顺序排列,沿肠系膜分开后平贴于滤纸上再固定。

8.取材用的剪刀、刀片要锋利。

9.取材时,对脏器病变部位的形状、色泽、位置、大小及切面等情况,做好实验记录。

10.核对实验编号,取材结束仔细核对各实验组编号(图2-2-19)。

图2-2-18~19.jpg

在进行组间对比研究时,必须注意抽检样品的部位要相同。由于生物组织中个体与总体的特点为个体分布的不均衡性及结构的不一致性,如肾组织中皮质肾单位与髓旁肾单位的数目及体积不同;肝组织中小叶中央静脉周围、门管区周围及小叶中带肝细胞内线粒体的数目、体积及形态均有差异,故必须在相同的区域内进行对比观察。


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